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    紫外-可見分光光度計在藥品檢測中的應用

     更新時間:2023-03-09 點擊量:2091

    藥品分析是保證藥品安全有效的重要手段,在藥品的研究、生產、流通、使用和監督管理等環節中均有舉足輕重的作用,其主要內容包括性狀分析、鑒別、檢查和含量測定等方面。高效液相色譜儀、氣相色譜儀、紫外分光光度計等是制藥生產中常用的檢測儀器。其中,紫外分光光度計由于準確度高、測定限度低、設備簡便、儀器成本低、易于操作等優點,已成為制藥生產中檢測設備之一,用于藥物鑒別、檢查和含量測定等。

    紫外-可見分光光度法是通過測定物質在紫外-可見光區(200-760nm)產生紫外-可見吸收光譜,根據吸收光譜的特性,對該物質進行定性和定量分析的方法。其理論基礎為朗伯-比耳定律,溶液的吸光度和吸光物質含量、液層厚度乘積成正比。對于一般的紫外分光光度法,其測量的相對誤差在1%~3%。隨著大量心得顯色劑的合成及應用,尤其是有關多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,推進了元素測定的靈敏度的大幅提高。采用預富集和示差法,適用質量分數從常量(1%~50%)到痕量(10-10~10-8)。紫外-可見分光光度法由紫外分光光度法和可見分光光度法兩種方法構成,這兩種方法在測定的原理、儀器、操作等方面皆相同。因此,統稱為紫外-可見分光光度法,測定儀器一般采用紫外-可見分光光度儀。

    在各國藥典中,藥品的理化常數、鑒別、檢查和含量測定等很多項目中,都能見到紫外分光光度法的應用實例。

    在制藥生產中,紫外分光光度法應用最多的是藥物含量的測定、藥物雜質檢測、藥物穩定性考察、釋放度、藥物負載行為測定及物質結構鑒定等方面。  目前利用紫外分光光度計分析的藥物品種有維生素、抗生素、解熱藥、去痛藥、降血壓藥、安定藥、鎮咳藥、滴眼藥、磺胺類藥、利尿藥、某些婦科藥、痢疾藥、腹瀉藥、抗腫瘤藥、抗結核藥等。

    一 、紫外分光光度法應用于藥物含量測定  紫外-可見分光光度法由于靈敏度較高,不僅可用于常量組分的含量測定,也可用于測定微量組分、超微量組分以及多組分混合物同時測定等,在藥物分析中主要用于原料藥含量測定、制劑含量測定、含量均勻度和溶出度的檢查等。

    1.1 含量測定的主要依據  朗伯-比耳定律是紫外-可見分光光度法含量測定的依據。朗伯-比耳定律是指單色光輻射穿過被測物質溶液時,在一定的濃度范圍內被該物質吸收的量(A)與該物質的濃度(C)和液層的厚度(L)成正比,其關系如下式:  常用含量測定的方法  測定時,除另有規定外,應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照,采用1cm的石英吸收池(紫外光區)或玻璃吸收池(可見光區),以吸收度最大的波長作為測定波長。一般供試品溶液的吸光度讀數,以在0.3~0.7的誤差最小。

    1.2.1 吸收系數法  吸收系數法是利用待測物質的吸收系數與測得的一定濃度時的吸光度比較計算含量的方法,又稱絕對法。該法是目前應用最多的方法。用本法測定時,吸收系數通常應>100,并注意儀器的校正和檢定。

    1.2.2 對照品比較法  對照品比較法是采用在相同條件下分別配制供試品溶液和對照品溶液,對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分規定量的(100±10)%,所用溶劑也應一致,在規定的波長處測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度后,按下式計算供試品中被測溶液的濃度,公式中,CX為供試品溶液的濃度;AX為供試品溶液的吸光度;CR為對照品溶液的濃度;AR為對照品溶液的吸光度。

    1.2.3 標準曲線法  標準曲線法是紫外-可見分光光度法中的方法之一。測定時,先取與被測物質含有相同組分的標準品,配成一系列濃度不同的標準溶液,在相同條件下,分別測定其吸光度。然后以濃度C為橫坐標,以相應的吸光度A為縱坐標,繪制A-C曲線。在相同條件下,測出供試品溶液的吸光度,從標準曲線上便可查出與此吸光度值對應的供試品溶液的濃度。  由于標準曲線對儀器的要求不高,因此是紫外-可見分光光度法中簡便易行的方法。

    1.2.4 比色法  測定能吸收可見光的有色物質、無色但經顯色反應可以生成有色的物質都可以采用本法在適宜的條件下進行測定。比色法通常稱為光電比色法,現代的比色分析采用分光光度計進行測定,故又稱可見分光光度法。  除另有規定外,比色法所用的空白系指用同體積的溶劑代替,對照品或供試品溶液,然后依次加入等量的相應試劑,并用同樣方法處理。在規定的波長處測定對照品和供試品的吸光度后,按對照品比較法計算供試品濃度。如《中國藥典》中利血平注射液、硫酸阿托品片等一些藥物和制劑的含量采用比色法測定。

    二、 紫外-可見分光光度法對原料藥的含量測定  《中國藥典》中原料藥的含量用百分含量表示。

    對照品對照法:含量  式中,CR為對照品溶液的濃度(g/mL);Ax為供試品溶液的吸光度;AR為對照品溶液的吸光度;m為稱取的供試品重量(g);D為供試品的稀釋倍數;V為供試品初次配制的體積(mL)。

    三 紫外-可見分光光度法對制劑的含量測定  制劑的含量則用標示量的百分含量表示。

    3.1 片劑的含量測定  由于片劑含量低,且含輔料,若采用原料藥的方法測定含量則有干擾,當片劑中主藥在紫外-可見光去有特征吸收光譜,則可采用靈敏度更高的紫外-可見分光光度法測定含量。有機堿性藥物,《中國藥典》中原料藥采用非水溶液滴定法,而片劑含輔料硬脂酸鎂對非水溶液滴定法有干擾,則采用紫外-可見分光光度法測定含量。

    3.2 注射劑的含量測定  若注射劑中主藥在紫外-可見光區有特征吸收,當注射劑中無附加成分或附加成分不干擾,則主藥的含量測定可直接采用紫外-可見分光光度法測定含量;當附加成分有干擾,則可采用消除干擾,或利用主藥與附加成分紫外吸收光譜的差異,再進行紫外-可見分光光度法測定主藥含量。如《中國藥典》中馬來酸氯苯那敏注射液的含量測定采用吸收系數法。




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